Chargaff规则:DNA分子的组成中:①嘌呤碱与嘧啶碱的摩尔数总是相等:A+G=T+C且A=T,G=C;②不同生物种属的DNA碱基组成不同;③同一个体的不同器官、不同组织的DNA具有相同的碱基组成。
作为探针的核苷酸序列要选取基因编码序列,避免用内含子及其他非编码序列。
原核生物的起始氨基酰-tRNA是甲酰蛋氨酰-tRNA(fMet-tRNAifMet),真核生物为蛋氨酰-tRNA(fMet-tRNAiMet)。
根据双链DNA分子中两条链碱基互补原则,若一条链中A=30%、G=24%、则其互补链碱基T=30%、C=24%。即T+C=54%,A+G=46%。
该酶在ATP的存在下,能催化氨基酸的活化以及与对应tRNA的结合反应。氨基酰-tRNA合成酶位于胞液,具有绝对专一性,对氨基酸及tRNA都能高度特异地识别。因此,在胞液中至少有20种以上的氨基酰-tRNA合成酶,这些酶的高度专一性是保证翻译准确性的关键因素。
mRNA含有遗传密码,作为蛋白质合成的模板。
进行PCR扩增的首要条件是设计一对人工合成的寡核苷酸引物。该引物序列与待扩增DNA模板两端的碱基序列互补。引物设计的原则包括:
①引物长度15~30个碱基,不能超过38个;
②G+C含量一般为40%~60%;
③碱基分布随机,避免数个嘌呤或嘧啶的连续排列;
④引物自身不应存在互补序列;
⑤两个引物之间不应有多于4个的互补序列;
⑥引物的3’端不应有任何修饰,5’端则可以被修饰;
⑦引物应有特异性。