某些非离子型亲水剂对促进免疫复合物的形成有显著的增强作用,如聚乙二醇(PEG)、吐温-20,其作用是消除蛋白质(抗原或抗体)分子周围的电子云和水化层,促进抗原、抗体分子靠近,结合形成大分子复合物。
终点法是在抗原抗体反应达到平衡时,即复合物形成后作用一定时间,通常是30~60分钟,复合物浊度不再受时间的影响,但又必须在聚合产生絮状沉淀之前进行浊度测定。速率法是在抗原抗体结合反应的过程中,在单位时间内两者结合的速度。速率法是测最大反应的速度,即反应达到顶峰时的峰值。抗原抗体结合反应在几十秒内得出结果,峰值的高低与抗原的量成正比,峰值出现的时间和抗体浓度、抗原抗体的亲和力直接相关。速率法的灵敏度和特异性都比终点法好。
对流免疫电泳时,抗原分子在电场力作用下向正极移动,抗体分子在电渗力作用下向负极移动,两者相向移动。
免疫浊度法最大的优点是稳定性好,敏感度高(达ng/L),精确度高(CV<5%),简便快速,易于自动化,无放射性核素污染,适合于大批量标本的检测,为此,已在免疫分析中奠定了坚实的基础。
沉淀反应中,沉淀线靠近抗原孔,表示抗体含量较多;靠近抗体孔,表示抗原含量多。抗原抗体在琼脂内扩散的速度受分子量的影响,分子量小的扩散快,反之则较慢。由于慢者扩散圈小,局部浓度大,形成的沉淀线弯向分子量大的一方。
免疫比浊是在过量的抗体中分别加入递增量的抗原,经一定时间后形成抗原抗体复合物,用浊度计测量反应液体的浊度,并由此推算样品中的抗原含量。