最好尽快做镜检，以防荧光消退，影响结果。

微粒小于入射光波长时，发生光的散射，在入射光的垂直方向可看到光亮通路，即丁达尔现象.

直接法是用特异荧光抗体直接滴加在标本上使之与抗原发生特异性结合的方法；间接法由针对抗原的第一抗体和用荧光标记针对第一抗体的第二抗体相继作用的方法；补体结合法是在抗原和抗体反应时加入豚鼠血清，用荧光标记的抗补体抗体示踪的方法，双标记法是用FITC和RB200标记不同的抗体，对同一标本作荧光染色，同时可见到橙红和黄球两种荧光色彩的方法。

异硫氰酸荧光素（FITC）为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水或酒精等溶剂。分子量为389.4，最大吸收光波长为490～495nm，最大发射光波长520～530nm，呈现明亮的黄绿色荧光。其主要优点是：①人眼对黄绿色较为敏感；②通常切片标本中的绿色荧光少于红色。其运用最为广泛。

荧光显微镜的光源、物镜、滤板、聚光器与普通显微镜的不同。

免疫荧光技术中，直接法可以用于检测抗原，而间接法除了可以检测抗原外，还可以检测抗体，如抗核抗体的检测。

直接法是用特异荧光抗体直接滴加在标本上使之与抗原发生特异性结合的方法；间接法由针对抗原的第一抗体和用荧光标记针对第一抗体的第二抗体相继作用的方法；补体结合法是在抗原和抗体反应时加入豚鼠血清，用荧光标记的抗补体抗体示踪的方法，双标记法是用FITC和RB200标记不同的抗体，对同一标本作荧光染色，同时可见到橙红和黄球两种荧光色彩的方法。

直接免疫荧光法具有操作简单、时程短、特异性高的优点。

荧光效率是指荧光分子将吸收的光能转变成荧光的百分率，与发射荧光光量子的数值成正比。荧光效率=发射荧光的光量分子数（荧光强度）／吸收光的光量子数（激发光强度），发射荧光的光量子数亦即荧光强度，除受激发光强度影响外，也与激发光的波长有关。