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【简答题】

(8分)基因打靶技术是建立在基因同源重组技术以及胚胎干细胞技术的基础上而发展起来的一种分子生物学技术。请结合图示回答下列有关问题: 注:neo r 是新霉素抗性基因;tk基因的表达可以使无毒的丙氧鸟苷代谢为毒性物质,导致细胞死亡。 (1)将目的基因和与细胞内靶基因同源的DN段都重组到____上,构建打靶载体(基因表达载体)。 (2)打靶载体测序验证正确后,利用____酶,将之线性化,以提高重组率。通过____技术将打靶载体导入胚胎干细胞,这样打靶载体和与细胞内靶基因同源的区段就有机会发生同源重组。 (3)为了筛选发生同源重组的细胞,可在培养液中加入____。最后还需要通过____技术鉴定同源重组的细胞(去除靶基因),将这样的细胞通过动物细胞培养后,获得大量打靶成功的细胞。其中,暂时不用的细胞进行____保存。 (4)将打靶成功的细胞注射入小鼠囊胚,移植到同种、____的母鼠体内,一段时间后对受体母鼠进行妊娠检查,确保其生下嵌合体小鼠。这种嵌合体小鼠长大后,体内同时存在被“修饰”过的基因和未被“修饰”的基因。如果某些小鼠的____(填“体细胞”或“生殖细胞”)恰巧被“修饰”过了,则它们的杂交后代中,就可能出现基因完全被“修饰”过的小鼠。

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举一反三

【多选题】在哺乳动物细胞中,RNA编辑:

A.
可能在转录后水平改变一个基因的编码能力
B.
能在小肠细胞中的apoBmRNA的中部插入一个终止密码子,在肝脏细胞中却不能
C.
通常使每个mRNA都发生很大的变化
D.
通过脱氨基可能改变特定的核苷酸

【单选题】下列不属于动物细胞工程应用的是[ ]

A.
大规模生产干扰素,用于抵抗病毒引起的感染
B.
为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞
C.
大规模生产食品添加剂、香料等
D.
利用胚胎移植技术,加快优良种畜的繁殖

【多选题】目前mRNA的分子生物学测定方法主要包括()

A.
Southern印迹杂交法
B.
Northern印迹杂交法
C.
RT-PCR法
D.
原位杂交
E.
原位PCR

【单选题】分子生物学的研究表明( )。

A.
细胞是遗传信息的载体
B.
细胞核是遗传信息的载体
C.
DNA是遗传信息的载体
D.
染色体是遗传信息的载体

【单选题】分子生物学的研究表明( )。

A.
细胞是遗传信息的载体
B.
细胞核是遗传信息的载体
C.
DNA是遗传信息的载体
D.
染色体是遗传信息的载体

【单选题】动物细胞获取的方法最常用的是:

A.
直接分离法
B.
机械法
C.
胰蛋白酶处理法
D.
原生质体法
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A.
可能在转录后水平改变一个基因的编码能力
B.
能在小肠细胞中的apoBmRNA的中部插入一个终止密码子,在肝脏细胞中却不能
C.
通常使每个mRNA都发生很大的变化
D.
通过脱氨基可能改变特定的核苷酸
【单选题】下列不属于动物细胞工程应用的是[ ]
A.
大规模生产干扰素,用于抵抗病毒引起的感染
B.
为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞
C.
大规模生产食品添加剂、香料等
D.
利用胚胎移植技术,加快优良种畜的繁殖
【多选题】目前mRNA的分子生物学测定方法主要包括()
A.
Southern印迹杂交法
B.
Northern印迹杂交法
C.
RT-PCR法
D.
原位杂交
E.
原位PCR
【单选题】分子生物学的研究表明( )。
A.
细胞是遗传信息的载体
B.
细胞核是遗传信息的载体
C.
DNA是遗传信息的载体
D.
染色体是遗传信息的载体
【单选题】分子生物学的研究表明( )。
A.
细胞是遗传信息的载体
B.
细胞核是遗传信息的载体
C.
DNA是遗传信息的载体
D.
染色体是遗传信息的载体
【单选题】动物细胞获取的方法最常用的是:
A.
直接分离法
B.
机械法
C.
胰蛋白酶处理法
D.
原生质体法
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