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【简答题】

四膜虫(Tetrahymena)是一种有两个胞核的有纤毛原生动物,小胞核(micronucleus)具有细胞染色体的主拷贝,其参与有性接合,但不参与日常基因的表达。大胞核(macronucleus)是一种由很多大小基因双链DN段形成的细胞基因组的“工作”拷贝(小染色体-minichromosomes),其参与基因转录,小染色体的许多拷贝中都有核糖体RNA的基因。可用梯度离心将其与其他小染色体分离,以进行进一步的研究。
通过电镜检测发现每个含核糖体基因小染色体为线性结构,长21kb。用琼脂糖凝胶电泳观察其仍为21kb(图16-3-24,泳道1)。如果用限制酶BglⅡ酶切小染色体,产生的两个片段13.4和3.8kb加起来不到21kb(图16-3-24,泳道2)。用其他限制酶酶切DNA,所得片段大小加起来仍旧不足21kb,而且每一种消化所产生的片段大小之和均不同。

如果未切割的小染色体在跑电泳之前先经过变性退火,那么21kb片段将被切割成正好是其一半的10.5kb。用双链片段代替(图16-3-24,泳道3),相似地,如果BglⅡ切割过的小染色体经变性和退火,则13.4kb片段将被其一半大小的6.7kb双链片段代替(图16-3-24,泳道4)。
请解释为什么限制酶切割下的片段加起来不是21kb?为什么经变性退火后其电泳形式就发生改变?你认为核糖体小染色体的序列是什么样的?

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参考答案:
举一反三

【单选题】有关琼脂糖凝胶电泳,说法正确的是

A.
可以用做变性电泳,测序DNA
B.
核酸迁移的方向是由正极到负级
C.
核酸迁移速度与核酸片段大小成反比
D.
琼脂糖凝胶分为浓缩胶和分离胶两部分

【单选题】常用于琼脂糖凝胶电泳 DNA 显色的物质是( )。

A.
硝酸银
B.
荧光素双醋酸酯 ( FDA )染色
C.
溴化乙锭( EB )
D.
荧光增白剂染色

【单选题】质粒DNA在琼脂糖凝胶电泳中的泳动率通常是

A.
线性>超螺旋>切口环状
B.
线性>切口环状>超螺旋
C.
超螺旋>切口环状>线性
D.
超螺旋>线性>切口环状
E.
切口环状>线性>超螺旋

【单选题】琼脂糖凝胶电泳实验中,DNA上样缓冲液,也称为loading buffer,其作用是

A.
使核酸在紫外灯下显色
B.
帮助样品沉降,并且起到肉眼指示的作用
C.
加强核酸的迁移速率
D.
使核酸带负电

【单选题】琼脂糖凝胶电泳时,电压一般不超过5 v/cm,指的是( )。

A.
凝胶的长度
B.
正负电极之间的距离
C.
凝胶板的长度
D.
凝胶孔到正电极之间的距离
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C.
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D.
琼脂糖凝胶分为浓缩胶和分离胶两部分
【单选题】常用于琼脂糖凝胶电泳 DNA 显色的物质是( )。
A.
硝酸银
B.
荧光素双醋酸酯 ( FDA )染色
C.
溴化乙锭( EB )
D.
荧光增白剂染色
【单选题】质粒DNA在琼脂糖凝胶电泳中的泳动率通常是
A.
线性>超螺旋>切口环状
B.
线性>切口环状>超螺旋
C.
超螺旋>切口环状>线性
D.
超螺旋>线性>切口环状
E.
切口环状>线性>超螺旋
【单选题】琼脂糖凝胶电泳实验中,DNA上样缓冲液,也称为loading buffer,其作用是
A.
使核酸在紫外灯下显色
B.
帮助样品沉降,并且起到肉眼指示的作用
C.
加强核酸的迁移速率
D.
使核酸带负电
【单选题】琼脂糖凝胶电泳时,电压一般不超过5 v/cm,指的是( )。
A.
凝胶的长度
B.
正负电极之间的距离
C.
凝胶板的长度
D.
凝胶孔到正电极之间的距离
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