还原糖的测定中次甲基蓝是一种氧化剂。但是在测定条件下其氧化能力比Cu²⁺弱，故还原糖先与Cu²⁺反应，待Cu²⁺完全反应后，稍过量的还原糖才会与次甲基蓝发生反应，溶液蓝色消失，达到终点。